【摘 要】
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目的探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,DAC)去除p14ARF基因启动子异常甲基化状态对人肺癌细胞生物学功能的影响。方法利用巢式甲基化特异性PCR(NMSP)检测spca1
【基金项目】
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山东省卫生厅科研项目(2007H2035)
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目的探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,DAC)去除p14ARF基因启动子异常甲基化状态对人肺癌细胞生物学功能的影响。方法利用巢式甲基化特异性PCR(NMSP)检测spca1细胞系及beas2b细胞系p14ARF启动子区域甲基化情况,根据细胞类型及是否进行DAC处理将细胞分为4组:spca1 DAC处理组、spca1对照组、beas2b DAC处理组、beas2b对照组,每组设置6个复孔,Western blot检测各组p14ARF蛋白表达情况,流式细胞术进行细胞凋亡检测。结果 NMSP检测到spca1细胞p14启动子区域存在异常的甲基化状态,使用DAC去除p14启动子区异常甲基化spca1细胞中ARF蛋白的表达恢复,细胞凋亡率spca1 DAC处理组(20. 69±1. 03)%显著高于spca1对照组(10. 63±0. 82)%(t=13. 17,P <0. 05);而在beas2b细胞系以上结果均无明显差异,其中细胞凋亡率beas2b DAC处理组(7. 38±0. 36)%与beas2b对照组(6. 98±0. 42)%无显著差异(t=1. 25,P> 0. 05)。结论 DAC去除p14ARF启动子区域异常甲基化后ARF蛋白表达恢复,诱导spca1细胞凋亡,对肺癌发生起到抑制作用。
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