【摘 要】
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目的探讨腺相关病毒介导的CDK2-shRNA对人黑色素瘤细胞A375凋亡,为黑色素瘤的防治提供技术支持。方法体外合成CDK2及转录终止序列,构建CDK2-shRNA的腺相关病毒载体和包装相应
【机 构】
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黑龙江中医药大学,福建中医药大学附属厦门第三医院皮肤科,吉林大学中日联谊医院普通外科,
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目的探讨腺相关病毒介导的CDK2-shRNA对人黑色素瘤细胞A375凋亡,为黑色素瘤的防治提供技术支持。方法体外合成CDK2及转录终止序列,构建CDK2-shRNA的腺相关病毒载体和包装相应的重组腺相关病毒,荧光显微镜检测转染和感染条件下CDK2-shRNA表达效果,MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡,免疫印迹检测cyclin E和E2F1表达。结果转染和感染的腺相关病毒介导的CDK2-shRNA在A375细胞均有表达且具有较低的细胞毒性;转染和感染的CDK2-shRNA均促进A375细胞发生凋亡;干扰CDK2可降低cyclin E和E2F1表达。结论腺相关病毒介导的CDK2-shRNA促进黑色素瘤细胞A375凋亡。
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