【摘 要】
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目的:探讨阿霉素对口腔鳞癌干细胞迁移、侵袭、凋亡的影响及其可能的机制.方法:体外培养人口腔鳞癌细胞系SCC25,通过流式细胞术分选CD44-和CD44+细胞,RT-PCR检测CD44-和CD44+
【机 构】
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陆军军医大学第一附属医院口腔科 重庆400038
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目的:探讨阿霉素对口腔鳞癌干细胞迁移、侵袭、凋亡的影响及其可能的机制.方法:体外培养人口腔鳞癌细胞系SCC25,通过流式细胞术分选CD44-和CD44+细胞,RT-PCR检测CD44-和CD44+细胞的Oct4、CD133、CD44和GAPDH的mRNA表达;检测和比较CD44-和CD44+细胞的克隆形成能力.CD44+细胞用阿霉素或β-catenin抑制剂LF3进行处理,分别使用Transwell和细胞划痕检测细胞侵袭和迁移能力,一步法TUNEL检测细胞凋亡水平,WB检测β-catenin和TCF-4的蛋白表达.结果:流式细胞术成功分离CD44-和CD44+细胞,RT-PCR检测CD44+细胞高表达Oct4、CD133和CD44 mRNA,CD44-细胞弱表达Oct4 mRNA,不表达CD133和CD44 mRNA;CD44+细胞的克隆形成能力显示显著强于CD44-细胞(P＜0.05).阿霉素显著降低了CD444+细胞的侵袭能力和迁移能力(P＜0.05),显著提高了CD44+细胞的凋亡率(P＜0.05);阿霉素显著降低了CD44+细胞β-catenin和TCF-4的蛋白表达(P＜0.05),LF3对β-catenin和TCF-4蛋白表达的影响与阿霉素比较无显著差异(P＞0.05).结论:阿霉素可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低口腔鳞癌干细胞迁移、侵袭能力,促进细胞凋亡.
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