GFAP特异性启动IκBα突变型基因真核表达载体的构建和鉴定

来源 :中国神经免疫学和神经病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anweiban
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目的构建GFAP特异性启动的、能稳定表达IkBα突变型基因的真核表达载体。方法用基因工程的方法将潮霉素抗性基因和GFAP特异性启动的IKBa突变型基因定向克隆入载体pBluescript—SK中,酶切反应鉴定重组载体SK—hyg和SK—hyg—GFAP/IkBαM。用脂质体法分别将载体SK—hyg和SK—hyg—GFAP/IkBαM转入永生化星形胶质细胞株和PC12细胞株中,经潮霉素(150μg/mL)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养,Western blot检测阳性细胞株中bcBa的表达,以NF-kB特异性
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