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结核分枝杆菌融合抗原Ag85B-ESAT6真核表达载体的构建及鉴定

来源 :河南工业大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：982114

【摘 要】

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以结核分枝杆菌H37Rv株的基因组作为模板，将Ag85B和ESAT6编码基因进行PCR扩增，然后采用基因剪接重叠扩增PCR法（gene SOEing）将其通过疏水甘氨酸接头（GGIGIAPG）连接融合，定向克隆至质

【作 者】

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程春明 曹以诚 杜正平 杨化强 郭旭 方翔 张珍武 

【机 构】

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华南理工大学生物科学与工程学院

【出 处】

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河南工业大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2006年3期

【关键词】

：

结核 AG85B ESAT6 融合基因 核酸疫苗 tuberculosis   Ag85B   ESAT6   fusion gene  DNA vaccine 

【基金项目】

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国家自然科学基金重大研究计划项目（90412015）,华南理工大学高水平大学建设重大项目（321-D75010）.

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以结核分枝杆菌H37Rv株的基因组作为模板，将Ag85B和ESAT6编码基因进行PCR扩增，然后采用基因剪接重叠扩增PCR法（gene SOEing）将其通过疏水甘氨酸接头（GGIGIAPG）连接融合，定向克隆至质粒Pvax1中，构建结核分枝杆菌Ag85B-ESAT6融合抗原的真核表达质粒Pvax1／AE．经单双限制性内切酶图谱、PCR产物及DNA测序分析等多种方法鉴定，证实Pvax1／AE真核表达质粒构建成功．为进一步研究其结核核酸疫苗原型的免疫保护效果奠定了基础．

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