大肠杆菌fadB缺失突变株构建及对聚羟基脂肪酸酯积累影响

来源 :大连理工大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:whiterain
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应用一种简单的方法构建出一株大肠杆菌脂肪酸降解基因B(fadB)缺陷型菌株KM32B(fadB∷Tet).该方法不需克隆和第二轮PCR,只需要一对各70个碱基的引物.引物的前45个碱基分别与大肠杆菌目的基因的3′和5′互补,后25个碱基分别与抗性(四环素Tet)基因的3′和5′互补.将PCR产物,即抗性基因两侧各带与目的基因3′和5′互补的45个碱基的片段,通过高频电转化入大肠杆菌KM32菌株.重组子经PCR验证整个fadB基因区域因被四环素基因置换而敲除.将两种Burkholderia caryophy
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