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目的 探讨来源于人甲胎蛋白( AFP)的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位多抗原肽(MAP)疫苗对原发性肝癌的抗肿瘤活性.方法 体外分离培养人类白细胞抗原(HLA)-A2.1阳性的健康志愿者外周血和HLA-A2.1转基因小鼠骨髓来源的成熟树突细胞(DC),用DC负载多肽疫苗,体内外诱导效应细胞,采用标准4 h 51Cr释放实验和酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测CTL活性.结果 (1)在最高效靶比时CTL表位MAP疫苗诱导的效应细胞对AFP阳性并且HLA-A2.1阳性的Hep3B肝癌细胞的杀伤率显著高于单肽表位诱导的效应细胞(73.5%±7.9%比45.6%±6.9%,P<0.01).(2)最高效靶比时AFP表位MAP疫苗和单肽疫苗诱导的效应细胞对AFP阴性而HLA-A2.1阳性的PLC/PRF/5肝癌细胞的杀伤率与阴性肽对照组比较,差异均无统计学意义(9.3%±3.9%、8.1%±2.8%比8.3%±2.6%,均P>0.05);MAP组和对应单肽组效应细胞对转染AFP全长cDNA的PLC/PRF/5/Ad-AFP肝癌细胞的杀伤率均显著高于阴性肽对照组(74.8%±10.5%、51.4%±12.6%比4.2%±1.3%,均P<0.01),而且MAP诱导的CTL对PLC/PRF/5/AFP肝癌细胞的杀伤率显著高于相应单肽(P<0.01).(3)最高效靶比时AFP表位MAP疫苗和单肽疫苗诱导的效应细胞对AFP阳性但HLA-A2.1阴性的HepG2肝癌细胞的杀伤率与阴性肽对照组差异均无统计学意义(均P>0.05);其对转染了HLA-A2.1全长cDNA的HepG2/HLA-A2.1细胞的杀伤率则均显著高于阴性肽对照组(71.8%±8.6%、46.5%±6.5%比4.1%±1.1%,均P<0.01),MAP诱导的CTL对HepG2/HLA-A2.1的杀伤率显著高于相应单肽(P<0.01).(4)AFP表位MAP疫苗和单肽疫苗诱导的效应细胞产生的IFN-γ斑点数均显著高于阴性对照肽[(158 ±23)、(78±12)比(3±1)斑点/105个细胞,均P <0.01],MAP的斑点数与阳性对照组[(166±32)斑点/105个细胞]差异无统计学意义(P>0.05),MAP的斑点数亦显著高于其单肽[(78±12)斑点/105个细胞,P<0.01].结论 AFP MAP诱导的CTL反应强于相应单肽诱导的CTL反应,对AFP阳性且HLA-A2.1相匹配的肿瘤细胞具有明显的杀伤效应;对AFP阴性的肿瘤细胞不具有杀伤效应.