【摘 要】
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目的构建人HIF-1α的mi R RNAi慢病毒载体。方法利用已经构建成功的针对人HIF-1α基因的mi RNA干扰质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-HIF-1αmi R,通过BP/LR反应,将EmGFP-HIF-1α-mi R
【机 构】
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第三军医大学新桥医院血液内科、重庆市医学重点学科
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目的构建人HIF-1α的mi R RNAi慢病毒载体。方法利用已经构建成功的针对人HIF-1α基因的mi RNA干扰质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-HIF-1αmi R,通过BP/LR反应,将EmGFP-HIF-1α-mi R表达框整合重组到产毒质粒pLenti6/V5-DEST中测序鉴定,用PLP1、PLP2和PLP/VSVG质粒共转染包装293FT细胞产毒,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定。结果经测序鉴定证实成功构建针对人HIF-1α基因的mi RNA慢病毒干扰载体pLenti6/V5
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