人ppGalNAc-T2的原核表达、纯化及其蓖麻蛋白样结构域的结构预测

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kelly2003
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多肽:Ⅳ-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T)是催化O-糖基化的起始酶,在O聚糖的形成中起着关键的作用.为更好地研究该家族酶的结构与功能,采用PCR技术从pDONR201-T2得到ppGalNAc-T2全长编码序列,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,获得相应表达产物,用谷胱甘肽S-转移酶(GST)亲和层析柱进行纯化,并进行了Western印迹检测和初步的酶活测定.为进一步研究其功能还在结构研究上利用网络结构模拟SWISS-MODEL服务器对ppGalNAc-T2的蓖麻蛋
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