【摘 要】
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选择ES细胞nanog基因中4个区域合成寡聚核苷酸,构建了4个含有小鼠U6启动子的siRNA(小分子干涉RNA)表达载体并瞬时转染小鼠ES-D3细胞.半定量RT-PCR分析显示,所构建的4个siRNA
【机 构】
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西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心
【基金项目】
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中国科学院资助项目,国家科技攻关项目,教育部科学技术研究项目
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选择ES细胞nanog基因中4个区域合成寡聚核苷酸,构建了4个含有小鼠U6启动子的siRNA(小分子干涉RNA)表达载体并瞬时转染小鼠ES-D3细胞.半定量RT-PCR分析显示,所构建的4个siRNA表达载体中有3个可以在细胞内转录出siRNA或shRNA(短发夹RNA),诱发RNA干涉(RNAinterference,RNAi),能显著抑制目的基因nanog的表达;同时发现,干扰的ES-D3细胞生长48 h后,集落形态与未干扰细胞相比差别不大,但隆起不如后者明显,形态也不如后者规则,生长速度也较慢,AK
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