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目的：测定大肠癌患者外周血血浆游离DNA中含表皮生长因子和卵泡抑素结构域的跨膜蛋白（TPEF）基因启动子区异常甲基化率及K-ras基因12密码子突变率，评估联合检测此二个分子标记非损伤性筛选和诊断大肠癌的可行性。方法：提取大肠癌患者外周血血浆DNA．采用突变富集PCR-RFLP法检测K-ras基因突变，甲基化特异性PCR法检测TPEF基因甲基化异常。结果：42例大肠癌患者血浆标本中，27例检测到TPEF甲基化异常，16例检测到K-ras基因12密码子突变，联合二个分子标记，大肠癌患者诊断符合率为76．2％