【摘 要】
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目的探讨建立稳定可靠的婴幼儿血管瘤干细胞分离培养体系。方法取增生期婴幼儿血管瘤标本，经胶原酶消化、CD133免疫磁珠分选，所得细胞接种于纤维连接蛋白铺层的96孔板，以含10%FBS的EBM-2培养液培养。分别进行细胞形态学观察，细胞表面标记流式细胞检测，细胞成管试验，细胞诱导分化成脂、成骨试验以及裸鼠皮下成瘤试验。结果从血管瘤组织分离纯化的CD133(＋)细胞，6 h开始贴壁，细胞呈多突起的纺锤形
【机 构】
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200011 上海交通大学附属上海市第九人民医院整复外科,200011 上海交通大学附属上海市第九人民医院整复外科,200011 上海交通大学附属上海市第九人民医院整复外科,200011 上海交通大学
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目的探讨建立稳定可靠的婴幼儿血管瘤干细胞分离培养体系。
方法取增生期婴幼儿血管瘤标本，经胶原酶消化、CD133免疫磁珠分选，所得细胞接种于纤维连接蛋白铺层的96孔板，以含10%FBS的EBM-2培养液培养。分别进行细胞形态学观察，细胞表面标记流式细胞检测，细胞成管试验，细胞诱导分化成脂、成骨试验以及裸鼠皮下成瘤试验。
结果从血管瘤组织分离纯化的CD133(＋)细胞，6 h开始贴壁，细胞呈多突起的纺锤形和星形；CD133(＋)血管瘤干细胞阳性表达CD29(99.5%)、CD44(97.9%)、CD90(87.6%)和CD105(98.5%)，几乎不表达CD31(0.2%)、CD34(0.1%)、CD45(0.1%)和CD144(0.1%)；在体外可形成网状类似血管壁的结构，并可被诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞；接种于裸鼠皮下可形成类似婴幼儿血管瘤的病灶。
结论该分离培养方法可获得血管瘤干细胞，为阐明血管瘤干细胞的特性及更广泛的应用奠定了良好的基础。
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