卡那霉素酶联免疫检测方法的建立及检测条件的优化

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制备卡那霉素的多克隆抗体,建立了间接竞争ELISA方法,并对间接ELISA检测方法进行条件优化。结果表明:最佳实验条件是以PBS(0.01mol/L、pH7.4)作为包被液,以碳0.05mol/LpH9.6酸缓冲液加0.1%的酪蛋白封闭酶标板;最佳的抗体稀释液配方是PBST溶液加4%的聚乙二醇6000,溶液选取pH8.5为佳,二抗稀释度选择1:3000,标准品稀释液则选择0.01mol/LpH7.4的PBS溶液。最终,卡那霉素的IC50值为9.9ng/ml,最低检测限为1.0ng/ml,检测的线性范围为1~500ng/ml。
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