大鼠骨髓来源内皮祖细胞体外增殖和凋亡及阿托伐他汀的干预

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背景:研究发现,阿托伐他汀具有心血管保护作用,能显著改善内皮功能,促进内皮祖细胞的动员、迁移和分化。现阶段在细胞体外培养水平上进行阿托伐他汀药物浓度筛选所进行的研究较少。目的:探讨不同浓度阿托伐他汀对大鼠骨髓来源内皮祖细胞体外生长特性的影响。方法:取SD大鼠长骨骨髓,用密度梯度离心法结合差异贴壁法提取单核细胞,用选择性培养液诱导培养内皮祖细胞,采用免疫荧光染色法鉴定细胞表面标志物。将内皮祖细胞分为对照组和4个不同浓度阿托伐他汀组(0.01,0.1,1,10μmol/L)进行培养,光镜下观察和MTT法检测细胞生长增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,硝酸还原酶法化学比色法检测培养液中一氧化氮和内皮型一氧化氮合酶水平。结果与结论:(1)对照组和阿托伐他汀组的细胞数量均表现为增长趋势,1μmol/L阿托伐他汀组增长最明显,10μmol/L阿托伐他汀组在7 d后出现下降趋势;(2)1μmol/L阿托伐他汀组凋亡率低于其他各组,10μmol/L阿托伐他汀组凋亡率高于其他各组;(3)0.01,0.1,1.0μmol/L阿托伐他汀组一氧化氮和内皮型一氧化氮合酶水平明显高于空白对照组(P<0.01),10μmol/L阿托伐他汀组一氧化氮和内皮型一氧化氮合酶水平明显低于其他各组(P<0.01);(4)结果表明,阿托伐他汀可通过增加内皮型一氧化氮合酶和一氧化氮的生成,促进内皮祖细胞增殖并减少凋亡,其中1μmol/L浓度的阿托伐他汀最适合内皮祖细胞培养。
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