重组抑肽酶的生产工艺研究

来源 :中国药科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cat521kiss
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目的:优化融合表达抑肽酶基因工程菌的发酵奈件,分离纯化抑肽酶。方法:设计3因素3水平的正交实验,考查玉米粉浓度、诱导时间和诱导剂乳糖浓度对菌体生长及蛋白表达的影响;在30L发酵罐中进行中试放大试验;菌体经超声破壁和离心得到融合蛋白包涵体,经Bio-gel P30凝胶过滤纯化复性,用FXa切割,回收目的蛋白,最后用Resouree RPC进行纯度验证。结果:融合蛋白的表达量为45%,包涵体复性率为70%以上,抑肽酶纯度为90%,总收率为32%,比活力为3.1EPU/mg。结论:实现了含抑肽酶融合蛋白的较高表
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