【摘 要】
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目的:分离纯化RFA结合蛋白并加以鉴定,为进一步深入研究RFA及其结合蛋白相互作用和参与AR介导的PSA基因表达奠定基础.方法:培养人前列腺癌细胞PC-3,提取核蛋白,以RFA序列为探
【机 构】
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山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东大学齐鲁医院胸外科
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目的:分离纯化RFA结合蛋白并加以鉴定,为进一步深入研究RFA及其结合蛋白相互作用和参与AR介导的PSA基因表达奠定基础.方法:培养人前列腺癌细胞PC-3,提取核蛋白,以RFA序列为探针进行亲和层析分离纯化目的蛋白,层析前后均用电泳迁移率变动分析(EMSA)检测目的蛋白的功能.经SDS-PAGE测定纯化蛋白的分子量,然后切下目的蛋白条带,进行蛋白质鉴定.结果:纯化蛋白在SDS-PAGE图谱上36kD附近呈现单一条带,氨基酸组成分析和质谱分析显示纯化蛋白条带含有2种蛋白,与核内不均一核糖核蛋白A1,A2(h
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