【摘 要】
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采用RT-PCR方法扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒临床分离株（HBKM2）的ORF5全基因,并进行了测序分析,根据ORF5的结构特点,进一步扩增了截去N端信号肽序列的ORF5（nsORF5）,并将其克隆到
【机 构】
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湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北工业大学生物工程学院
【基金项目】
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国家科技支撑计划（2006BAD06A18）,湖北省农业科技创新中心资助项目（2007-620-001-03）
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采用RT-PCR方法扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒临床分离株（HBKM2）的ORF5全基因,并进行了测序分析,根据ORF5的结构特点,进一步扩增了截去N端信号肽序列的ORF5（nsORF5）,并将其克隆到pGEX-KG原核表达载体,构建了重组质粒pKG-ns5,经酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21（DE3）进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,克隆的nsORF5基因与谷胱甘肽转移酶（GST）基因获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-nsGP5分子量约为43kD
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