【摘 要】
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为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相色谱质谱联用采集免疫共沉淀数据筛选出肌动蛋白(ACTB)和vimentin进行基因引物设计、克隆、酵母表达载体构建和蛋白互作鉴定.结果 显示:成功克隆出绒山羊vimentin基因CDS区序列的长度为1401 bp,ACTB基因CDS区序列的长度为1128 bp;构
【机 构】
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内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010010;内蒙古自治区生物制造重点实验室,内蒙古呼和浩特010010;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083
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为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相色谱质谱联用采集免疫共沉淀数据筛选出肌动蛋白(ACTB)和vimentin进行基因引物设计、克隆、酵母表达载体构建和蛋白互作鉴定.结果 显示:成功克隆出绒山羊vimentin基因CDS区序列的长度为1401 bp,ACTB基因CDS区序列的长度为1128 bp;构建了酵母表达载体;试验组共转化pGBKT7-vimentin与pGADT7-ACTB的Y2HGold菌株在二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基和四缺板SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-GaL/AbA培养基上,均能生长出淡蓝色菌落,而在对照组共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的二缺板SD/-Trp/-Leu/X-α-GaL/AbA培养基上长出白色菌落,表明共转化的pGBKT7-vimentin与pGADT-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac被激活,共转化pGBKT7空质粒与pGADT7-ACTB重组质粒的下游报告基因Lac未被激活.提示:vimentin与ACTB两种蛋白间存在相互作用.
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对新疆南疆某农户疑似感染牛乳头瘤样本进行病原鉴定及基因分型.采集疑似感染乳头瘤病变组织,进行病理组织学检查,并以乳头瘤病毒(BPV)L1基因特异性引物(MY09/MY11)进行PCR扩增、测序,以及L1基因核苷酸同源性比对、系统进化树分析.结果:患牛体表多处生长有菜花样瘤状物呈扁圆形且大小不一,病理组织学观察可见部分肿瘤细胞呈梭形,表皮细胞严重角质化并增生,棘细胞层增厚、胞质呈空泡状;经PCR扩增后得到的序列命名为AWT-1,AWT-1与BPV-1基因型参考株L1基因核苷酸同源性为98.6%,且与BPV-
根据疾控系统科研工作特点,梳理科研经费管理现状与矛盾问题,结合实践经验,提出了健全经费管理制度、优化经费保障渠道、加强经费预算编制、规范经费报销流程的建议.疾控系统科研经费管理特点鲜明、内容复杂,全过程科学规范管理有助于提高科研工作效率.
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