结核分枝杆菌Rv0901基因原核表达质粒的构建及其表达

来源 :中国呼吸与危重监护杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dkmlyn
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目的为研究结核分枝杆菌基因Rv0901的功能提供材料.方法 PCR扩增Rv0901基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT获得重组表达质粒,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达,通过SDS-PAGE、GST-纯化试剂盒鉴定并纯化表达产物.结果从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Rv0901基因;成功构建了融合表达质粒pGEX-Rv0901;重组质粒经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达45 kDa的GST-Rv0901融合蛋白.结论本实验成功表达并纯化GST-Rv0901融合蛋白
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