【摘 要】
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摘要 菌毛装配蛋白（Flp pilus assembly protein， PAP）是一种分泌蛋白，参与细菌菌毛的组装，表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA，用其菌毛装配蛋白基因（PAP）的特异引物进行PCR扩增，获得该基因的目的片段，序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种 （GenBank登录号：CP001677.5） PAP基因序列一致
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摘要 菌毛装配蛋白（Flp pilus assembly protein， PAP）是一种分泌蛋白，参与细菌菌毛的组装，表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA，用其菌毛装配蛋白基因（PAP）的特异引物进行PCR扩增，获得该基因的目的片段，序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种 （GenBank登录号：CP001677.5） PAP基因序列一致。功能预测表明它含有两个与分泌功能相关的CpaC 和Secretin结构域。PCR产物通过EcoRⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体pET32a-PAP。将pET32a-PAP载体转化BL21（DE3）大肠杆菌，经终浓度为1 mmoL/L IPTG诱导，目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni2 -NTA层析柱纯化，并作为抗原腹腔免疫小白鼠，获得效价在1∶500～1∶1 000的多克隆抗血清。Western blot分析表明，PAP多克隆抗血清特异性强;以田间样品总蛋白做抗原时，能特异性检测染病样品。本研究为PAP蛋白功能研究和开发柑橘黄龙病菌的蛋白检测产品提供研究基础。
关键词 柑橘黄龙病; 基因表达; PAP蛋白; 抗血清制备
中图分类号： S 436.66
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特朗普先废除伊核协议，再重启对伊朗的制裁，对伊朗步步紧逼，这背后到底是为什么？面对美国金融封锁、石油禁运、军事威胁等手段，伊朗能否承受得住呢？地缘考量 特朗普在伊核问题上的行为看似任性，其实透着对地缘政治的考量。 伊朗是欧亚十字路口的重要交通枢纽，一直令外来者觊觎。历史上，马其顿人、阿拉伯人、蒙古人先后入侵并统治这里，近代伊朗独立后，沙俄及其后的苏联对伊朗领土虎视眈眈。冷战开始后，联美制苏成为
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