【摘 要】
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目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]在牙乳头干细胞向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养儿童牙乳头干细胞,培养基中添加1,25(OH)2D3,使其终浓度分别为1、10和10
【机 构】
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天津市第五中心医院口腔科,天津市第五中心医院病理科,天津市第五中心医院中心实验室
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目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]在牙乳头干细胞向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养儿童牙乳头干细胞,培养基中添加1,25(OH)2D3,使其终浓度分别为1、10和100 nmol/L,另设对照组加入等体积生理盐水。采用噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞增殖周期变化,Western blot法检测维生素D受体(VDR)、核因子-κB受体活化剂配体(RANKL)及骨保护素(OPG)蛋白表达水平。采用siRNA技术沉默VDR表达后(siR-VDR组),检测其对RANKL和OPG蛋白表达的影响。结果对照组及1、10、100 nmol/L 1,25(OH)2D3组增殖指数(PIx)分别为49.78±2.03、50.14±1.55、48.81±1.91和48.56±2.15,不同浓度1,25(OH)2D3对牙乳头干细胞的增殖无明显作用(F=3.174,P>0.05)。对照组牙乳头干细胞中可见一定水平VDR、RANKL和OPG的蛋白质表达;加入1,25(OH)2D3后,VDR、RANKL和OPG蛋白表达水平均有不同程度升高,其中以VDR上升趋势最为显著;转染siR-VDR后,VDR、RANKL和OPG的蛋白质表达水平下降。结论 1,25(OH)2D3通过调节VDR水平影响牙乳头干细胞向成骨细胞方向的分化过程。
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