【摘 要】
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目的:本研究将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养,并传代,施加不同频率和大小的静水压,观察其对兔软骨细胞表型的影响。方法:用酶消化法获取兔关节软骨细胞,分别在不同的
【机 构】
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上海市交通大学医学院附属瑞金医院伤骨科研究所; 上海市交通大学医学院附属瑞金医院伤科; 上海市仁和医院口腔科; 上海市交通大学医学院附属瑞金医院伤科 上海200025;
【基金项目】
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国家自然基金资助(编号:30271628);上海市自然科学基金(编号:03ZR14084);上海市教委基金(编号:02XJ21021,04BB22);上海市卫生局课题(编号:034077)
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目的:本研究将兔软骨细胞放在静水压力负载装置中培养,并传代,施加不同频率和大小的静水压,观察其对兔软骨细胞表型的影响。方法:用酶消化法获取兔关节软骨细胞,分别在不同的压力和频率下作普通培养瓶贴壁的单层培养,并传代。40 kPa循环静水加压为实验组,40 kPa持续静水加压培养和常压培养作为对照。Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原免疫组化,苏木素套核染色,倒置显微镜观察摄像。以RT-PCR方法检测软骨细胞中蛋白聚糖、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原mRNA的表达。结果:在循环静水压力下培养,软骨细胞有较高的细胞增殖率,培养至第7代未见明显表型改变,仍然表达Ⅱ型胶原、蛋白聚糖和聚集蛋白聚糖等。常压培养,软骨细胞传代至第5代以后,逐渐失去软骨细胞的特有表型。而持续静水压力培养的软骨细胞传代至第3代以后就开始逐渐失去软骨细胞的特有表型。结论:一定的循环静水压力能维持软骨细胞的合成分泌功能,有助于软骨细胞特有表型的稳定。
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