抑制性消减杂交构建肺腺癌及同源正常组织cDNA文库

来源 :中国肿瘤临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ahzhangxz

【摘要】

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目的:分离肺腺癌及同源正常组织中的未知特异性基因片段,并建立相应的cDNA文库,为研究肿瘤基因疫苗打下良好的基础方法:从肺腺癌及同源正常组织中分别提取总RNA,磁珠分离mRNA

【作者】

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李殿俊杨秋霞李大林曲昌发郗雪艳王辉刘莉

【机构】

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哈尔滨医科大学免疫教研室,哈尔滨医科大学第三临床医学院

【出处】

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中国肿瘤临床

【发表日期】

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2002年12期

【关键词】

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抑制性消减杂交肺腺癌 CDNA文库 Suppression subtractive hybridization Lung adenocarcinomaHomo

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目的:分离肺腺癌及同源正常组织中的未知特异性基因片段,并建立相应的cDNA文库,为研究肿瘤基因疫苗打下良好的基础方法:从肺腺癌及同源正常组织中分别提取总RNA,磁珠分离mRNA并逆转录为dsDNA,经RasI消化酶切将Adaptor-1和Adaptor-2R适配子分别与肺腺癌肖化后的cDNA连接(作为tester),再与正常同源组织(作为driver)进行正向杂交和逆向杂交具有上述2种不同适配子的杂交后cDNA分子,通过初次PCR和巢式PCR富集未知的cDNA片段,此PCR产物与TA克隆载体pGEM连接,

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