鸡白细胞介素-2基因的克隆与酵母表达质粒的构建

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ROVINZ
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从经Con A活化的4周龄岭南黄鸡脾脏淋巴细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡白细胞介素-2(IL-2)cDNA片断.PCR产物克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒命名为Ⅱ-2-T,经菌落PCR与限制酶切鉴定,然后测序,结果表明克隆片断长度为432 bp,与预期大小一致,为鸡IL-2基因的编码区全长.将IL-2-T克隆重组质粒进行双酶切(Cla Ⅰ与XbaⅠ),回收IL-2片断插入同样酶切的毕赤酵母表达质粒pPICZα-C,构建重组Ⅱ-2-C表达质粒,为鸡IL-2在毕赤酵
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