【摘 要】
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为建立快速检测中药材川贝母成分的特异性PCR法，从NCBI数据库下载植物HMGR基因序列，根据同源性区域设计兼并引物，对川贝母及其易混品鳞茎基因组进行扩增。通过比对川贝母特异性DNA片段区域，设计引物扩增获得川贝母基原物种特异核酸片段。从川贝母基原鳞茎中提取DNA，设计特异引物对BMH-TF/BMH-TR，优化PCR扩增条件，通过特异性、灵敏度实验验证，建立特异性PCR检测体系。采用该方法从川贝母
【机 构】
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四川省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
【基金项目】
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四川省创新能力提升工程公益深化项目“几种名贵中药材真实性鉴定分子检测技术的建立”（2016GYSH-032）； 成都市科技局重点研发计划“川贝母真伪及掺假量化判定技术研究”（2019-YF05-02257-SN）；
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为建立快速检测中药材川贝母成分的特异性PCR法，从NCBI数据库下载植物HMGR基因序列，根据同源性区域设计兼并引物，对川贝母及其易混品鳞茎基因组进行扩增。通过比对川贝母特异性DNA片段区域，设计引物扩增获得川贝母基原物种特异核酸片段。从川贝母基原鳞茎中提取DNA，设计特异引物对BMH-TF/BMH-TR，优化PCR扩增条件，通过特异性、灵敏度实验验证，建立特异性PCR检测体系。采用该方法从川贝母基原中扩增出一条120 bp左右条带，而非川贝母样品、空白对照在相同条件下无扩增条带，检测灵敏度为2 ng/μL，检测下限为4 ng。对10个市售药材的检测结果证明，该方法简便可行、重现性好。该PCR法可快速、准确鉴别川贝母基原，具有操作简便、快速、特异性高的优点。
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