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为有效地筛选到带有正确基因的转化子,探讨了活性筛选方法。将木聚糖酶基因与pET20b重组,转化BL21(DE3)大肠杆菌,选取转化子,放入0.5mLLB培养基过夜培养,补加9.5mL培养基2.5h后诱导,收集并冻融裂解细胞,检测酶活性。通过对10个转化子的筛选,其中7个转化子酶活性接近或高于阳性对照菌落,认定为阳性转化子,经DNA测序证明基因序列正确。这个过程只要2~3天,具有快速简便特点。与以往筛选方法中针对转化子中的基因不同,作者直接检测转化子酶活性,筛掉不能表达活性酶的突变基因;其次,用冻融裂解细胞