藏药秦艽、独一味醇提物对RA患者外周血单个核细胞分泌TNF-α、IL-1β、MIF抑制作用的研究

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目的:研究不同浓度藏药秦艽、独一味醇提物对人类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外培养条件下细胞增殖和培养液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibition factor,MIF)水平的影响,以探讨其抗风湿活性。方法:应用醇提法将藏药秦艽、独一味提取分离,应用高效液相色谱法(HPLC)测定藏药秦艽醇提物中龙胆苦甙含量及独一味醇提物中木犀草素含量,四氮唑蓝(MTT)法检测秦艽、独一味醇提物对人RA患者外周血单个核细胞体外培养条件下细胞增殖情况的影响;分别予藏药秦艽、独一味醇提物及秦艽加独一味醇提物成分处理PBMC,收集培养上清液,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中TNF-α、IL-1β及MIF的含量。结果:高效液相色谱法测定藏药秦艽醇提物中龙胆苦甙含量为6.08%,独一味醇提物中总黄酮(以木犀草素计)含量为2.84%,MTT法检测结果显示,3种类型不同浓度秦艽、独一味醇提物对RA患者外周血单个核细胞的增殖及细胞生长均有抑制作用。用ELISA方法检测3种类型不同浓度药物对RA患者PBMC培养上清液中TNF-α、IL-1β及MIF的含量,结果显示TNF-α、IL-1β及MIF的水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);秦艽与独一味醇提物联合使用时,对TNF-α、IL-1β及MIF的抑制作用强于单独使用秦艽或独一味醇提物时,且随着浓度的增大,该差异更加明显;而且本研究还显示单药秦艽醇提物、单药独一味醇提物及秦艽加独一味3种类型药物处理组RA患者PBMC培养上清液中的TNF-α与MIF水平之间、IL-1β与MIF水平之间、TNF-α及IL-1β的水平之间均呈正相关,说明RA患者PBMC在同种类型药物成分的处理下,当其MIF水平降低时,也出现TNF-α、IL-1β水平的降低。结论:藏药秦艽、独一味醇提物抑制人RA患者外周血单个核细胞体外培养条件下细胞的增殖及培养上清液中炎性因子TNF-α、IL-1β及MIF的水平,不同浓度的秦艽、独一味醇提物对人RA患者外周血单个核细胞体外培养条件下细胞的增殖及培养上清液中炎性因子TNF-α、IL-1β及MIF的水平抑制作用有差异,而且两药联合增强此抑制作用,提示秦艽、独一味抗风湿的部分机理可能是由于其有效成分龙胆苦苷、木犀草素抑制了淋巴细胞、单核细胞增殖以及抑制炎性因子TNF-α、IL-1β及MIF而起的作用,这可能是其抗风湿的作用机制之一。
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