目的:考察影响高效液相色谱中溶质相对保留时间的因素,并尝试更好的保留时间偏差校正方式。方法:以 C₁₈柱为例,运用甲醇-水体系,以苯/萘、甲苯/萘的相对保留时间及相对容量因子为评价指标,考察反相液相色谱系统中可能影响溶质保留行为的因素,包括色谱柱填料、填装工艺、批号、柱效、仪器、流动相比例、流速等。并以乙酰螺旋霉素的分析为例,比较相对保留时间法和相对容量因子法的校正效果。结果:对溶质的相对保留时间影响较大的是色谱柱填料、流动相比例和仪器,而填装工艺、批号、柱效、流速等因素则影响不大。与相对保留时间法比较,相对容量因子法在校正溶质保留行为的偏差方面,效果更好。在实际样品分析时,同一类色谱柱表现出的选择性基本一致。结论:采取以下方法可以提高高效液相色谱的定性准确性:（1）对色谱柱分类,并选择同一类色谱柱进行实验;（2）用相对容量因子代替相对保留时间校正溶质的保留行为;（3）严格控制流动相的比例。