清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤线粒体融合蛋白2表达的影响

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目的 研究清脑益元汤对大鼠脑缺血损伤后线粒体融合蛋白2表达的影响,探究清脑益元汤对缺血性脑损伤神经元保护作用的部分机制.方法 将96只健康SD大鼠按随机数字表法分为4组:空白组(n=6)、假手术组(n=30)、模型组(n=30)、清脑益元汤组(n=30),除空白组外,假手术组、模型组及清脑益元组按缺血损伤后1d、3d、7d、14 d、28d五个取材时间点分为5个亚组.预给药7d后,采用改良的Longa线栓法制备大鼠急性脑缺血损伤模型,造模成功后取大鼠缺血侧皮质区脑组织,采用免疫蛋白印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)法检测大鼠缺血侧皮质区Mfn2蛋白及mRNA表达.结果 ①神经功能缺损评分:空白组和假手术组大鼠的神经功能评分为0分,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,清脑益元组在各个时间点的神经功能缺损症状均有改善(P<0.01);②Western blot法:空白组和假手术组Mfn2蛋白表达水平在同一时间点比较无明显差异(P>0.05);与假手术组同一取材时间点相比,模型组Mfn2蛋白表达水平降低(P<0.01);与模型组同一取材时间点比较,清脑益元汤组Mfn2蛋白表达水平显著上升(P<0.01);③Real-Time PCR法:空白组和假手术组Mfn2mRNA表达水平在同一时间点比较无明显差异(P>0.05);与假手术组同一取材时间点相比,模型组Mfn2mRNA表达水平显著降低(P<0.01);与模型组同一取材时间点相比,清脑益元汤组Mfn2mRNA表达水平升高(P<0.01).结论 清脑益元汤可通过上调脑缺血损伤后Mfn2表达,抑制线粒体损伤,减少神经细胞凋亡,进而发挥脑保护的作用.
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