【摘 要】
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单链特异性(SSS)核酸酶是基因组学研究的有效工具。本研究对绿豆芽核酸酶、S1和芹菜汁提取物三种SSS核酸酶检测桉树ESTP检测的酶切条件进行了优化,优化因子依次包括Mg2+浓度、酶
【机 构】
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中国林业科学研究院热带林业研究所,南京林业大学森林资源与环境学院
【基金项目】
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本研究由国家自然科学基金(30671703)和863划(2006AA100109)资助华中农业大学汪念博士提供CJE及其酶切缓冲液,谨致谢意!
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单链特异性(SSS)核酸酶是基因组学研究的有效工具。本研究对绿豆芽核酸酶、S1和芹菜汁提取物三种SSS核酸酶检测桉树ESTP检测的酶切条件进行了优化,优化因子依次包括Mg2+浓度、酶切温度、酶用量和/或pH值等因子。三种酶的最适酶切温度均为60℃。绿豆芽核酸酶优化后的酶切反应体系为:10×Buffer(pH5.56)1.0μL(NaAc300mmol/L,Nacl1.0mol/L,ZnAc210mmol/L,甘油50%,MgCl2100mmol/L),PCR产物5μL,酶4.5U,超纯水补至10
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