【摘 要】
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背景与目的 MicroRNAs(miRNAs)是短的非编码RNA,是能够调控基因表达、影响细胞过程、促进疾病发展的重要分子.在许多疾病中可以观察到miRNA表达的变化,包括肝炎、心血管疾病
【机 构】
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261053 潍坊,潍坊医学院病理学教研室;261053 潍坊,潍坊医学院护理学院;261053 潍坊,潍坊医学院医学研究实验中心
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背景与目的 MicroRNAs(miRNAs)是短的非编码RNA,是能够调控基因表达、影响细胞过程、促进疾病发展的重要分子.在许多疾病中可以观察到miRNA表达的变化,包括肝炎、心血管疾病和癌症.本研究旨在探讨miR-144-3p靶向调控胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)对肺腺癌细胞侵袭和转移的影响.方法 通过生物信息学数据库查询miR-144-3p在肺腺癌患者中的表达情况;利用mirTarPathway对miRNA进行KEGG通路富集分析;定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-144-3p在肺腺癌细胞系中的表达情况与质粒转染效率;Transwell实验检测不同组细胞侵袭迁移能力的变化.生物信息学确定miR-144-3p的关键基因(Hub基因);双荧光素酶靶标实验检测miR-144和IRS1的相互结合情况;Western blot实验检测IRS1在不同细胞系的表达及过表达miR-144后IRS1的表达情况.结果 miR-144-3p在肺腺癌组织中表达降低,qRT-PCR结果提示miR-144-3p在肺腺癌细胞A549中的表达显著降低(P<0.05)且过表达质粒转染成功(P<0.05);过表达miR-144后,细胞的迁移、侵袭和增殖能力下降(P<0.05);IRS1在肺腺癌组织中表达上调;生存分析表明高表达IRS1的肺腺癌患者预后不良(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,miR-144可特异识别IRS1的3'-UTR抑制报告酶的表达(P<0.05);Western blot结果提示IRS1在A549细胞中表达升高(P<0.05),过表达miR-144后,IRS1蛋白表达水平下降(P<0.05);Transwell实验证明,miR-144-3p可通过靶向调控IRS1抑制肺腺癌细胞的侵袭和转移(P<0.05).结论 miR-144-3p通过靶向调控IRS1抑制A549细胞的侵袭和迁移能力,进而在肿瘤中发挥抑癌作用.
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