【摘 要】
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目的:研究早期生长反应蛋白1(early growth response protein 1,Egr-1)在白细胞介素1β(interleu-kin-1β,IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡中的作用。方法:体外分离培养小鼠关节软
【机 构】
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中山大学附属第三医院急诊科,中山大学附属第五医院骨科,中山大学附属第三医院骨科
【基金项目】
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广东省科技计划(No.2009A030200012;No.2011B061300011)
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目的:研究早期生长反应蛋白1(early growth response protein 1,Egr-1)在白细胞介素1β(interleu-kin-1β,IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡中的作用。方法:体外分离培养小鼠关节软骨细胞,用IL-1β刺激不同的时间后,用Hoechst 33258染色,计算发生核皱缩细胞占全部细胞的比例;采用定量RT-PCR(qRT-PCR)方法检测Egr-1 mRNA表达水平;采用Western blotting方法检测Egr-1及激活型caspase-3蛋白的表达水平;采用Lipo-fectamine RNAiMAX将Egr选择性干扰片段转染软骨细胞,采用qRT-PCR及Western blotting观察RNA片段的干扰效率。结果:IL-1β刺激体外培养的软骨细胞4 h、8 h和12 h后,分别引起约7%、22%和41%细胞凋亡,同时激活型caspase-3表达上调。IL-1β诱导软骨细胞凋亡的同时,Egr-1 mRNA及蛋白质呈时间依赖的表达上调。2个siRNA片段成功干扰Egr-1表达后,细胞12 h凋亡率从约40%下降到14%和12%,同时激活型caspase-3的表达被有效抑制。结论:Egr-1介导了IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,可能在骨关节炎的发病过程中发挥重要作用。
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