分泌人源性单克隆抗体永生化淋巴细胞系的构建

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Wang_Sheng
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目的:构建分泌人源性单克隆抗体( McAb) 的永生化B 淋巴细胞系。方法:用正丁醇法提取的人卵巢癌细胞系ao1017 抗原在含免疫活化剂的无血清培基中免疫人淋巴细胞;将制备ao 1017 细胞DNA 转染经体外免疫的淋巴细胞。采用ELISA 筛选和有限稀释法克隆化。结果:建成4 株分泌抗卵巢癌McAb 的转染体细胞AT1 、AT2 、AT3 和AT4 ;McAb 相加试验表明,它们识别卵巢癌抗原分子的同一表位。AT4 已在体外培养460 多天,冻存复苏后仍保持抗体产生能力。夹心ELISA 发现,人源性McAb AT4 能与卵巢癌细胞表面可溶性抗原发生免疫反应。结论:体外免疫和DNA 转染的结合,可建成分泌人源性McAb 的永生化B 淋巴细胞系,为人源性McAb 的产生提供了一条技术途径
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