【摘 要】
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目的:采用腺病毒介导的去除穿膜区序列的大鼠线粒体融合素基因2(tMfn2)感染血管平滑肌细胞(VSMCs),研究其促VSMCs凋亡的作用及其相关的信号通路.方法:用携带大鼠线粒体融合素
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科,美国国家卫生研究所心血管研究室
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目的:采用腺病毒介导的去除穿膜区序列的大鼠线粒体融合素基因2(tMfn2)感染血管平滑肌细胞(VSMCs),研究其促VSMCs凋亡的作用及其相关的信号通路.方法:用携带大鼠线粒体融合素基因2(Mfn2)的腺病毒(Adv-Mfn2-GFP)和携带tMfn2基因的腺病毒(Adv-tMfn2-GFP)感染VSMCs,采用激光共聚焦显微镜技术观察tMfn2和Mfn2的融合蛋白在细胞中的定位;细胞凋亡ELISA方法、TUNEL染色法研究Mfn2、tMfn2对VSMCs凋亡的影响;Western Blot方法研究tMfn2促进VSMCs凋亡的相关信号通路.结果:激光共聚焦显微镜成像技术证实tMfn2融合蛋白主要游离于细胞质内,而Mfn2融合蛋白主要位于线粒体外膜.采用ELISA方法证实Adv-tMfn2-GFP感染组促进VSMCs凋亡作用比Adv-Mfn2-GFP感染组更显著;Adv-tMfn2-GFP感染组TUNEL染色的凋亡细胞较Adv-Mfn2-GFP感染组明显增多(P
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