microRNA-1和microRNA-133参与小鼠诱导多能干细胞向心肌的分化

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目的研究microRNA-1(miRNA-1)和microRNA-133(miRNA-133)对小鼠诱导多能干细胞(mi PSCs)向心肌分化的影响。方法 RT-PCR分析mi PSC分化过程中microRNA-1和microRNA-133的表达变化;microRNA-1和micro-133反义寡核苷酸转染mi PSCs,增强miRNA-1和miRNA-133表达;并按照转染分子的不同,将细胞分为对照组(添加miRNA-U6)、miRNA-1组、miRNA-133组和miRNA-1+miRNA-133组。RT-PCR、q-PCR和免疫荧光化学染色检测miRNA转染并诱导mi PSCs分化后,各组细胞内miRNA-1和miRNA-133的表达变化以及心肌细胞相关特异性基因和蛋白的变化。结果 mi PSCs心肌分化过程中miRNA-1,miRNA-133的表达具有差异性,均在后期有显著增高(P<0.01);在分化过程中单独过表达miRNA-1和miRNA-133对心肌的分化并未有促进作用,但共表达miRNA-1和miRNA-133后,却显著增加心肌细胞的搏动数量和心肌基因的表达,并且促进了心肌细胞成熟。结论 miRNA-1和miRNA-133通过协同作用促进mi PSCs体外分化为心肌细胞,显著提高mi PSC向心肌细胞定向分化效率。
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