茶多酚对米曲霉α-淀粉酶的回收及其特性的影响

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研究绿茶中多酚类对米曲霉来源的α-淀粉酶特性的影响.从绿茶中提取茶多酚(TP),对米曲霉α-淀粉酶进行络合、沉淀及回收;以Bernfeild法测定α-淀粉酶与TP络合后,在不同温度、不同pH值、不同底物浓度的活性变化.结果表明:茶多酚对米曲霉α-淀粉酶无活性抑制作用,两者之间具有起混作用;0.3%的茶多酚浓度,获得最大α-淀粉酶活性回收率(约71%);α-淀粉酶与TP络合后,最适反应温度由30~50℃范围变为60~70℃;最适pH值由3.0~8.0变为5.0~6.0;在80℃下,活性变化总趋向与游离的α-淀粉酶相似,180min后能够保存85%的酶活力,但是在前40min,酶活力下降较快;Lineweever-Burk图表明,络合后的α-淀粉酶Km由0.18%变为1.03%(可溶性淀粉底物浓度).结论:米曲霉α-淀粉酶与TP络合后活性不受抑制并可通过这种络合回收,络合后的α-淀粉酶,最适反应温度及最适pH值变大、变窄;对底物的亲和力下降.
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