【摘 要】
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目的克隆DsbA—L基因启动子，并对其活性进行初步分析。方法以人基因组DNA为模板，利用PCR技术扩增DsbA—L基因5’端2115bp片段（从翻译起始点ATG上游-2128-14区域）。将PCR产物插入
【机 构】
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上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科、上海市糖尿病重点实验室、上海市糖尿病研究所、上海市糖尿病临床医学中心
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目的克隆DsbA—L基因启动子，并对其活性进行初步分析。方法以人基因组DNA为模板，利用PCR技术扩增DsbA—L基因5’端2115bp片段（从翻译起始点ATG上游-2128-14区域）。将PCR产物插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic。随后，构建5’端系列缺失的报告基因质粒。将构建的-系列质粒转染3T3-L1和HEK293细胞，检测荧光索酶活性。利用在线软件MAPPER预测转录调控关键序列潜在的转录因子结合位点。通过Real—time PCR比较这些转录因子在肥胖和正常人脂肪组织中的表达。结果成
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