海绵动物保存及DNA提取方法的研究

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海绵标本长期、完整的保存是开展海绵分类学及分子进化研究的重要前提,本研究以建立通用的海绵动物标本的保存方法及快速、完整的基因组DNA提取方法为主要目的,通过对硅质的山海绵(Mycale sp.)和钙质的白枝海绵(Leucosoleniidae sp.)为材料进行–20℃冰冻、乙醇固定、冰冻后风干和乙醇固定后风干等4种保存方法进行研究,同时采用酚-氯仿法、高盐法、CTAB法等3种基因组DNA提取方法,测试了4种保存方法的DNA提取效率。实验结果显示,海绵样品的4种保存方法以及3种DNA提取方法对于硅质海绵以及钙质海绵虽然在提取的DNA得率上有差异,但都能获得较高纯度基因组DNA。从经济成本、方便性、潜在的污染等因素考虑,高盐法是首选的提取海绵基因组DNA的方法;乙醇固定保存的海绵样品DNA得率最高,冰冻的海绵样品得率最低,推荐采用乙醇固定保存海绵样品的方法。
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