猪生殖与呼吸综合征病毒△Gp5／M／N串联基因的克隆及原核表达

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：JoQn

【摘要】

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采用RT—PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株VR2332中扩增AGp5、M和N基因片段，通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5／M／N，将其克隆到原核表达载体pET-30a（＋）上，并转化大肠杆菌

【作者】

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邵磊冉旭华闻晓波倪宏波王密朴范泽

【机构】

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黑龙江八一农垦大学预防兽医学黑龙江省重点实验室

【出处】

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中国兽医科学

【发表日期】

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2009年2期

【关键词】

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猪生殖与呼吸综合征病毒 △Gp5基因 M基因 N基因原核表达 porcine reproductive and respiratory syndrome vi

【基金项目】

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基金项目：黑龙江省农垦总局攻关项目（HNKXIV-08-03-01）

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采用RT—PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株VR2332中扩增AGp5、M和N基因片段，通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5／M／N，将其克隆到原核表达载体pET-30a（＋）上，并转化大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）pLysS，筛选表达PRRSV pET-△Gp5／M／N蛋白的菌株。经IPTG诱导表达，进行sDS—PAGE分析和Western-blotting。结果表明，PRRSV pET—△Gp5／M／N蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达，纯化后的蛋白可与PRRSV阳性血清发

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