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目的
探讨转录因子E2F1对脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖、分化的影响及其可能的作用机制。
方法选取6～8周龄野生型(WT)和E2F1基因敲除(E2F1－/－)小鼠，分离获取WT和E2F1－/－原代ADSCs，培养至第4代(P4)，观察比较两组细胞形态及鉴定细胞表面标志物。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组细胞的增殖能力，并经14 d成脂诱导分化后行油红O染色，观察脂滴的形态及数目。Western blot检测两组细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)蛋白水平的表达。
结果成功获得稳定传代的ADSCs，体外观察两组细胞形态比较差异无统计学意义，细胞表面标志物CD29、CD44、CD90为阳性，而CD31为阴性。细胞计数试剂盒(CCK-8)结果显示，WT ADSCs较E2F1－/－ADSCs增殖能力强(1.85±0.03比1.32±0.20，t＝16.641，P<0.05)。成脂诱导结果表明，WT ADSCs组脂滴较大较圆，且脂滴数目多于E2F1－/－ADSCs组(1 890±128比1 109±116，t＝18.505，P<0.05)。Western blot结果表明，WT ADSCs组PPAR-γ蛋白表达水平较E2F1－/－ADSCs组高(0.81±0.02比0.44±0.01，t＝3.040，P<0.05)。
结论转录因子E2F1通过促进PPAR-γ的表达从而增强ADSCs的增殖及成脂分化作用。