【摘 要】
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目的 探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制.方法 将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔.除空白血浆组外,其余各组以Ang Ⅱ(10-7 mol·L-1)诱导构建细胞增殖及纤维化模型.空白血浆组及模型组以15％空白血浆培养,益心泰含药血浆组以15％益心泰含药血浆培养,干预24 h.采用CCK-8法检测CFs细胞增殖情况;ELISA法测定细胞中Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Collagen
【机 构】
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湖南中医药大学,湖南长沙410208
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目的 探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制.方法 将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔.除空白血浆组外,其余各组以Ang Ⅱ(10-7 mol·L-1)诱导构建细胞增殖及纤维化模型.空白血浆组及模型组以15％空白血浆培养,益心泰含药血浆组以15％益心泰含药血浆培养,干预24 h.采用CCK-8法检测CFs细胞增殖情况;ELISA法测定细胞中Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)及转化生长因子(TGF-β1)含量;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western Blot法检测细胞中TGF-β1、B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测CFs的增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Collagen Ⅰ/ⅢmRNA表达水平.结果 15％益心泰含药血浆对CFs无明显的促细胞增殖或抑制作用.与空白血浆组比较,模型组细胞G0/G1期的细胞百分率明显降低(P＜0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显升高(P＜0.01);细胞凋亡率有所下降,但差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平均显著升高(P＜0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显上调(P＜0.01),Bax蛋白表达明显下调(P＜0.01);PCNA、α-SMA、Collagen Ⅰ/Ⅲ mRNA表达水平均明显升高(P＜0.01).与模型组比较,益心泰含药血浆组细胞的G0/G1期细胞百分率明显升高(P＜0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显降低(P＜0.01),细胞凋亡率明显升高(P＜0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平明显降低(P＜0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显下调(P＜0.01),Bax蛋白表达明显上调(P＜ 0.01);PCNA、α-SMA、Collagen Ⅰ/Ⅲ mRNA表达水平均明显降低(P＜0.01).结论 益心泰含药血浆能够抑制CFs细胞增殖分化及纤维化,可能与其调控Bax/Bcl-2平衡及下调纤维化相关因子表达有关.
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