探讨八聚体结合转录因子4假基因5(OCT4-pg5)对人膀胱癌T24细胞迁移和侵袭的影响及其机制。
方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OCT4-pg5在5种膀胱癌细胞株和膀胱永生化上皮细胞SV-HUC-1中的表达。利用Lipfectamine 2000将OCT4-pg5干扰质粒瞬时转染至膀胱癌T24细胞中，通过RT-qPCR检测各组细胞中OCT4-pg5的转染效果；通过细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测干扰OCT4-pg5的表达对T24细胞迁移和侵袭的影响；RT-qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、β-连环蛋白(β-catenin)表达变化。
结果与膀胱永生化上皮细胞(SV-HUC-1)比较，OCT4-pg5在膀胱癌细胞(5637、EJ、BIU-87、TCCSUP和T24)中的表达增加，以T24细胞最为明显(P<0.01)。RT-qPCR结果显示：转染si-OCT4-pg5干扰质粒后，T24细胞中OCT4-pg5表达明显降低(P<0.01)。划痕实验及Transwell侵袭实验结果表明，干扰OCT4-pg5表达后，T24细胞的迁移率为(28.50±4.08)%，细胞穿过膜数目为(104.50±6.95)个；分别与相应阴性对照组比较明显减弱[(43.26±5.49)%，P<0.01；(140.50±8.90)个，P<0.01]。RT-qPCR和Western blot结果显示：与阴性对照组比较，干扰OCT4-pg5表达后，T24细胞的E-cadherin表达增加(P<0.01)，Vimentin和β-catenin表达减少(P<0.01，P<0.01)。
结论OCT4-pg5在膀胱癌细胞中呈高表达，干扰OCT4-pg5表达能抑制膀胱癌T24细胞迁移和侵袭，其机制可能与其影响E-cadherin、Vimentin、β-catenin蛋白表达有关。