目的 观察糖尿病大鼠视网膜组织糖基转移酶表达改变情况,为进一步研究糖基转移酶及其介导的酶促糖基化反应参与糖尿病性视网膜病变发病机制建立研究基础.方法 实验研究.STZ诱导建立糖尿病大鼠模型,应用RT-PCR法观察已明确基因序列的部分糖基转移酶在糖尿病大鼠视网膜组织的表达情况.提取视网膜组织蛋白,SDS-PAGE电泳,RCA-I凝集素染色以及大鼠眼球组织切片RCA-I凝集素染色,观察视网膜组织蛋白糖基化修饰变化情况.对实时荧光定量PCR及组织切片凝集素分析的相关结果采用独立样本t检验进行统计学分析.结果 实时PCR检测:6个受检糖基转移酶在糖尿病大鼠组及正常大鼠组相对基因表达量分别为:O-linked N-acetylglucosamine transferase(0.16.50±0.1160, 0.1160±0.0363);UDP-Gal:betaGlcNAc beta1,3-galactosyltransferase (0.0186±0.0122,0.0152±0.0047);alpha 1,4-galactosyltransferase(0.0040±0.0040,0.00.54±0.0022):mannoside acetylghcosaminyltransferase 1(0.0228±0.0166,0.0187±0.0050);UDP-glucose ceramide glucosyltransferase(0.0129±0.0096,0.0116±0.0040);UDP-Gal:betaGlcNAc beta 1,4-galactosyltransferase 1(0.0157±0.0010,0.0081±0.0016).糖尿病大鼠视网膜组织中β1,4半乳糖基转移酶-1(UDP-Gal:betaGlcNAc beta 1,4-galactosyltransferase 1,GalT-1)的表达上调(t=6.847,P=0.002);蛋白凝集素及组织凝集素染色分析发现:糖尿病大鼠视网膜组织中Galβ 1→4GlcNAc糖基化基团修饰表达上调.结论 糖尿病状态下,大鼠视网膜组织中β1,4半乳糖基转移酶-1的表达及其介导的酶促糖基化反应上调.初步的实验结果为进一步研究糖基转移酶及其介导的酶促糖基化反应参与糖尿病视网膜病变的发病机制建立了相关实验基础。
糖尿病大鼠视网膜组织糖基转移酶表达改变的初步研究
【摘 要】
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目的 观察糖尿病大鼠视网膜组织糖基转移酶表达改变情况,为进一步研究糖基转移酶及其介导的酶促糖基化反应参与糖尿病性视网膜病变发病机制建立研究基础.方法 实验研究.STZ诱导建立糖尿病大鼠模型,应用RT-PCR法观察已明确基因序列的部分糖基转移酶在糖尿病大鼠视网膜组织的表达情况.提取视网膜组织蛋白,SDS-PAGE电泳,RCA-I凝集素染色以及大鼠眼球组织切片RCA-I凝集素染色,观察视网膜组织蛋白糖
【机 构】
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200080,上海交通大学附属第一人民医院眼科,200080,上海交通大学附属第一人民医院眼科,复旦大学附属华山医院眼科,复旦大学上海医学院基因中心,200080,上海交通大学附属第一人民医院眼科
【发表日期】
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2010年46期
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