家蚕蛹期特异基因BmCP283的启动子活性分析

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前期研究鉴定了家蚕蛹期特异表达基因BmCP283,并克隆了翻译起始位点上游长度为2004 bp的启动子区序列BmCP283P.用PCR方法扩增了BmCP283P启动子9个不同区域的片段,构建由其驱动的荧光素酶基因报告载体,并转染BmE细胞进一步分析该启动子的活性.结果显示,BmCP283P启动子序列由上游2004 bp递减至1 743 bp,以及由1 608 bp递减至1 328 bp,其活性显著增强;而从1 328 bp递减至1 189 bp,其活性则显著减弱.这暗示2 004~1 743 bp和1 608~1 328 bp区域可能存在抑制BmCP283P启动子活性的调控元件,而1 328~1 189 bp区域可能存在启动子活性增强元件.另外,蜕皮激素(20E)诱导能增强BmCP283P启动子的活性,暗示20E参与了BmCP283基因的转录调控.研究结果不仅有助于阐明BmCP283基因的转录调控机理,也为人为调控家蚕蛹期发育提供了潜在的可用启动子.
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