【摘 要】
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目的 探讨CD73对大鼠心肌细胞(CMs)增殖和功能的影响.方法 体外培养原代大鼠CMs和大鼠心肌细胞系H9C2,构建慢病毒CD73过表达载体和空载病毒组,分别转染CMs和H9C2.实验分组:CD73过表达组(OE组)和阴性对照组(NC组),即CMs-OE组和CMs-NC组;H9C2-OE组和H9C2-NC组,每组各5只.Real-time PCR法检测转染病毒后各组细胞CD73基因水平表达情况;MTT法检测细胞增殖能力变化;无损伤心肌细胞功能分析仪检测CMs细胞增殖曲线、倍增时间和搏动变化.结果 慢病毒
【机 构】
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郑州第七人民医院心内科,郑州450000;郑州第七人民医院心内科,郑州450000;新乡医学院河南省医用组织重点实验室,河南新乡453003
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目的 探讨CD73对大鼠心肌细胞(CMs)增殖和功能的影响.方法 体外培养原代大鼠CMs和大鼠心肌细胞系H9C2,构建慢病毒CD73过表达载体和空载病毒组,分别转染CMs和H9C2.实验分组:CD73过表达组(OE组)和阴性对照组(NC组),即CMs-OE组和CMs-NC组;H9C2-OE组和H9C2-NC组,每组各5只.Real-time PCR法检测转染病毒后各组细胞CD73基因水平表达情况;MTT法检测细胞增殖能力变化;无损伤心肌细胞功能分析仪检测CMs细胞增殖曲线、倍增时间和搏动变化.结果 慢病毒转染CMs和H9C272 h后,过表达组CD73 mRNA水平明显高于对照组(P＜0.05);CMs和H9C2转染后3～4d的增殖能力为OE组大于NC组(P＜0.05);CMs和H9C2细胞增殖曲线均显示OE组高于NC组,CMs和H9C2倍增时间为OE组低于NC组(P＜0.05);CMs转染后72 h显示OE组细胞搏动率高于NC组,OE组转录因子T-同源盒基因5(TBX5)表达和血管内皮生长因子(VEGF)的分泌高于NC组,而缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及肝病坏死因子α(TNF-α)的分泌低于NC组.结论 CD73可促进CMs和H9C2的增殖,促进CMs搏动及TBX5表达和VEGF分泌,抑制HIF-α和TNF-α的分泌.
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