目的 探讨HBV复制过程中HBx蛋白对原代小鼠肝细胞周期的影响。方法采用原代小鼠肝细胞为研究系统，用野生型HBV质粒（pHBV）和HBx蛋白表达缺失的HBV质粒（pHBV△X）分别转染细胞。Westernblot检测细胞周期蛋白cyclinD1、cyclin E、cyclinA及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p16（p16）、p21的表达水平l实时荧光定量PCR和Southernblot检测HBVDNA复制水平。两组之间比较用两样本均数f检验，多样本均数间的比较用方差分析及q检验。结果新分离肝细胞和原代培养24、48、72h肝细胞的细胞周期蛋白表达水平无明显差异；转染48h后，pHBV组细胞与pHBV△X组细胞周期蛋白条带灰度值相比，前者cyclinD1、p21、cyclinE表达量较高，p16的表达量较低，统计量t值分别为15．713，22．897，14．680，-19．584，P值均〈0．05。培养72h后提取HBVDNA，Southernblot检测HBVDNA复制中间体松散环状DNA、双链线性DNA、单链DNA的水平，经条带灰度扫描，pHBV组的水平（分别为3288．336±448．011、6458．318±182．163、2760．613±393．561）明显高于pHBV△X组（分别为515．721±62．530、2122．228±28．347、1632．013±207．021）及空白对照组，P值均〈0．05 实时荧光定量PCR检测HBVDNA复制水平，pHBV组【每个细胞（987．50±47．80）拷贝】也明显高于pHBVAX组【每个细胞（303．67±33．94）拷贝】，t=20．203，P〈0．05。结论HBx蛋白能通过调节细胞周期中各蛋白的表达，使细胞由静止期（G0）进入DNA合成前期（G1）并停滞于G1期，从而促进HBV的复制。