【摘 要】
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以枯草芽孢杆菌基因组为模板通过PCR扩增获得谷氨酰胺酶基因ylaM,构建重组质粒pMA5-ylaM,将其转化到枯草芽孢杆菌168中获得重组菌BS168/pMA5-ylaM,并在宿主菌成功得到表达,纯
【机 构】
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江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
【基金项目】
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国家863计划项目(2015AA021004);国家自然科学基金项目(21276110,31500065,31400082);江苏省青年自然科学基金项目(BK20150142);中国博士后科学基金资助项目(2015M570407,2016T90421);江苏高校优势学科建设工程资助项目
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以枯草芽孢杆菌基因组为模板通过PCR扩增获得谷氨酰胺酶基因ylaM,构建重组质粒pMA5-ylaM,将其转化到枯草芽孢杆菌168中获得重组菌BS168/pMA5-ylaM,并在宿主菌成功得到表达,纯化后的谷氨酰胺酶比酶活大小为939.48 U/mg。谷氨酰胺酶的反应最适pH为7.5,反应最适温度为55℃,La^3+、Zn^2+、Fe^3+和Al^3+对谷氨酰胺酶活力具有一定的抑制作用,在NaCl浓度为15%~17.5%的条件下,该酶酶活力可以保留50%以上。在5 L罐中,通过分批补料发酵,其最高酶活力产量
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