【摘 要】
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目的 探讨碱性成纤维生长因子(FGF-2)、丹酚酸B(Sa1B)以及二者联合诱导(FGF-2+SalB)对骨髓间充质干细胞(MSC)定向分化为心肌样细胞的影响.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSC,对第2代MSC定向诱导,依次为FGF-2组、SalB组、FGF-2 +SalB组以及空白对照组,相差显微镜观察细胞形态变化；免疫细胞化学技术检测诱导4周BMSC结蛋白,α-横纹肌肌动蛋白、心肌肌钙
【机 构】
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河北北方学院药学系药理教研室 河北北方学院药学系组织学与胚胎学教研室,河北张家口 075000
【出 处】
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第十五届中国神经精神药理学学术会议
论文部分内容阅读
目的 探讨碱性成纤维生长因子(FGF-2)、丹酚酸B(Sa1B)以及二者联合诱导(FGF-2+SalB)对骨髓间充质干细胞(MSC)定向分化为心肌样细胞的影响.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSC,对第2代MSC定向诱导,依次为FGF-2组、SalB组、FGF-2 +SalB组以及空白对照组,相差显微镜观察细胞形态变化；免疫细胞化学技术检测诱导4周BMSC结蛋白,α-横纹肌肌动蛋白、心肌肌钙蛋白T(cTnT)及心肌连接蛋白43 (Cx43)的表达；透射电镜对分化细胞进行鉴定；以半定量RT-PCR法在诱导后7,14和28 d检测细胞心肌早期转录因子GATA-4,Nkx2.5的表达.结果诱导各组的BMSC均可见结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白、cTnT及Cx43的阳性细胞,其中联合诱导组的阳性率均最高.诱导各组与对照组上述四标记物的阳性率均具有显著性差异(P＜0.05).透射电镜观察：分化细胞的胞质内可见平行排列的肌丝,多靠近细胞膜,并富含内质网、线粒体、糖原和核糖体.RT-PCR结果显示,诱导组细胞GATA-4和Nkx2.5于诱导后7d弱表达,14 d表达增强,28 d表达减弱.结论FGF-2,SalB以及二者联合,均可将MSC诱导为心肌分化表型,其中FGF-2 +SalB组各蛋白阳性表达率最高,其心肌样细胞的转化率亦高于其他组.
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