玉米抗黄曲霉Ti基因的克隆与表达

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[目的]对玉米抗黄典霉基因(胰蛋白酶抑制剂基因Ti)进行克隆并诱导表达,为以后的研究打下基础。[方法]提取抗黄3号玉米种子总RNA,电泳检测其浓度及纯度,利用RT-PCR体系扩增玉米种子Ti基因,回收目的基因,将目的基因与PMD18-T载体连接并将连接产物转入大肠杆菌感受态细胞,提取重组质粒DNA进行酶切鉴定。回收Ti基因并与表达载体PGEX-4T-1连接,诱导表达并检测表达产物。[结果]胰蛋白酶抑制剂以二聚体的形式存在,体外对黄曲霉孢子的萌发和菌丝的生长同样具有抑制作用。[结论]通过对玉米Ti基因的研究
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