褪黑素RIA的建立及肝抑郁症大鼠血浆褪黑素含量的观察

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目的:建立褪黑素的放射免疫分析法,观察肝抑郁症小鼠模型血浆褪黑素含量的变化.方法:利用甲醛将褪黑素与牛甲状腺球蛋白连接后免疫新西兰白兔获得高品质褪黑素抗血清,125Ⅰ标记褪黑素获得标记物,非平衡竞争法建立褪黑素放射免疫分析方法.利用随机组合多项应激方法建立大鼠肝抑郁症模型,并测定其冬夏两季血浆及松果体褪黑素含量.结果:抗血清滴度1:1800,亲和常数1.7×109L/M;125Ⅰ-褪黑素,比放强度55μCi/μg,放化纯度93%,稳定期65d;方法灵敏度5pg/ml,批内CV 6.5%,批间CV 11%;无论冬季还是夏季,生理组与模型组相比大鼠血浆、松果体褪黑素含量均有非常显著性差异(P<0.01),无论生理组还是模型组,冬季和夏季相比大鼠血浆、松果体褪黑素含量均有极显著性差异(P<0.001).结论:褪黑素放免法灵敏度高(5pg/ml)稳定期长(65d),可满足褪黑素研究工作的需求,标记物免疫活性好稳定期长.动物模型测定的结果说明慢性应激肝抑郁症与褪黑素之间确实存在明确的相关性,但慢性应激肝抑郁症的严重程度与季节并无明确的关联.另外,冬夏不同季节内褪黑素含量的显著差异主要是因为光照强度和总量的不同.
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